Mèsi paske w vizite Nature.com. Vèsyon navigatè w ap itilize a gen sipò CSS limite. Pou pi bon rezilta, nou rekòmande pou itilize yon navigatè ki pi nouvo (oswa enfim mòd konpatibilite nan Internet Explorer). Antretan, pou asire sipò kontinye, nou pral montre sit la san estil ak JavaScript.
Etablisman modèl bèt nan chanjman modik (MC) se yon baz enpòtan pou etidye MC. Senkant-kat New Zeland Blan lapen yo te divize an gwoup sham-operasyon, gwoup implantation nan misk (gwoup ME) ak gwoup implantation nucleus pulposus (gwoup NPE). Nan gwoup NPE a, disk entèrvèrtebral la te ekspoze pa apwòch anterolateral lonbèr chirijikal epi yo te itilize yon zegwi pou twou L5 kò vertebral la tou pre plak la fen. NP te extrait de disque intervertebral L1/2 a pa yon sereng Et enjeksyon ladan l. Perçage yon twou nan zo subkondral la. Pwosedi chirijikal yo ak metòd perçage nan gwoup enplantasyon misk la ak gwoup operasyon sham la te menm jan ak gwoup implantation NP. Nan gwoup ME a, yo te mete yon moso nan misk nan twou a, pandan y ap nan gwoup la sham-operasyon, pa gen anyen yo te mete nan twou a. Apre operasyon an, yo te fè analiz MRI ak tès byolojik molekilè. Siyal la nan gwoup NPE a chanje, men pa te gen okenn chanjman siyal evidan nan gwoup la simulation-operasyon ak gwoup la ME. Obsèvasyon histolojik te montre ke pwopagasyon nòmal tisi yo te obsève nan sit enplantasyon an, ak ekspresyon IL-4, IL-17 ak IFN-γ te ogmante nan gwoup NPE a. Enplantasyon NP nan zo subkondral la ka fòme yon modèl bèt nan MC.
Chanjman modik (MC) se blesi nan endplates vètebral yo ak mwèl zo adjasan vizib sou D 'sonans mayetik (MRI). Yo trè komen nan moun ki gen sentòm ki asosye1. Anpil etid te mete aksan sou enpòtans ki genyen nan MC akòz asosyasyon li yo ak doulè nan do ki ba (LBP) 2,3. de Roos et al.4 ak Modic et al.5 poukont premye dekri twa diferan kalite anomali siyal subkondral nan mwèl zo vètebral la. Modik tip I chanjman yo hypointense sou T1-weighted (T1W) sekans ak hyperintense sou T2-weighted (T2W) sekans. Lezyon sa a revele endplates fisure ak tisi granulasyon vaskilè adjasan nan mwèl zo a. Modik tip II chanjman yo montre gwo siyal sou tou de sekans T1W ak T2W. Nan kalite sa a nan blesi, yo ka jwenn destriksyon endplate, osi byen ke ranplasman istolojik gra nan mwèl zo adjasan a. Modik tip III chanjman yo montre siyal ki ba nan sekans T1W ak T2W. Yo te obsève blesi sklerotik ki koresponn ak endplates yo6. MC konsidere kòm yon maladi patolojik nan kolòn vètebral la epi li asosye byen ak anpil maladi dejeneratif nan kolòn vètebral la7,8,9.
Lè ou konsidere done ki disponib yo, plizyè etid te bay Sur detay sou etyoloji ak mekanis patolojik nan MC. Albert et al. sijere ke MC ka koze pa èrni disk8. Hu et al. atribiye MC a grav degeneration disk10. Kroc te pwopoze konsèp nan "rupture disk entèn," ki deklare ke chòk disk repete ka mennen nan microtears nan endplate la. Apre fòmasyon fann, destriksyon endplate pa nwayo pulposus (NP) ka deklanche yon repons otoiminitè, ki plis mennen nan devlopman nan MC11. Ma et al. pataje yon opinyon menm jan ak rapòte ke otoiminite NP-induit jwe yon wòl kle nan patojèn nan MC12.
Selil sistèm iminitè yo, espesyalman CD4+ T lenfosit k ap ede yo, jwe yon wòl enpòtan nan patojenèz otoiminite13. Sous-ensemble Th17 ki fèk dekouvri pwodui proinflammatory cytokine IL-17, ankouraje ekspresyon chemokine, ak stimul selil T nan ògàn ki domaje yo pwodwi IFN-γ14. Selil Th2 tou jwe yon wòl inik nan patojèn repons iminitè yo. Ekspresyon IL-4 kòm yon selil reprezantan Th2 ka mennen nan konsekans imunopatolojik grav15.
Malgre ke anpil etid klinik yo te fèt sou MC16,17,18,19,20,21,22,23,24, toujou gen yon mank de modèl bèt apwopriye eksperimantal ki ka imite pwosesis la MC ki souvan rive nan imen epi yo ka itilize pou mennen ankèt sou etyoloji a oswa nouvo tretman tankou terapi vize. Jiska dat, se sèlman kèk modèl bèt nan MC yo te rapòte pou etidye mekanis patolojik ki kache yo.
Ki baze sou teyori otoiminitè Albert ak Ma pwopoze, etid sa a te etabli yon modèl MC lapen ki senp ak repwodiktif pa ototransplanting NP tou pre plak la fen vètebral komanse fouye. Lòt objektif yo se obsève karakteristik istolojik modèl bèt yo ak evalye mekanis espesifik NP nan devlopman MC. Pou sa ka fèt, nou itilize teknik tankou byoloji molekilè, MRI, ak syans istolojik pou etidye pwogresyon MC.
De lapen te mouri nan senyen pandan operasyon, ak kat lapen te mouri pandan anestezi pandan MRI. 48 lapen ki rete yo te siviv epi yo pa te montre okenn siy konpòtman oswa newolojik apre operasyon.
MRI montre ke entansite siyal la nan tisi a entegre nan twou diferan diferan. Entansite siyal nan kò vètebral L5 nan gwoup NPE a piti piti chanje nan 12, 16 ak 20 semèn apre ensèsyon (sekans T1W te montre siyal ki ba, ak sekans T2W te montre siyal melanje plis siyal ki ba) (Fig. 1C), pandan y ap parèt MRI. nan de lòt gwoup yo nan pati entegre rete relativman estab pandan menm peryòd la (figi 1A, B).
(A) Reprezantan MRI sekans nan kolòn vètebral la lonbèr nan 3 pwen tan. Pa gen okenn anomali siyal yo te jwenn nan imaj yo nan gwoup la simulation-operasyon. (B) Karakteristik siyal kò vètebral yo nan gwoup ME yo sanble ak sa yo ki nan gwoup operasyon sham la, epi pa gen okenn chanjman siyal enpòtan yo obsève nan sit la entegre sou tan. (C) Nan gwoup NPE a, siyal ki ba a klèman vizib nan sekans T1W, ak siyal melanje ak siyal ki ba yo vizib klèman nan sekans T2W. Soti nan peryòd 12 semèn rive nan peryòd 20 semèn, siyal segondè sporadik ki antoure siyal ki ba yo nan sekans T2W diminye.
Ou ka wè ipèrplasi zo evidan nan sit enplantasyon kò vètebral la nan gwoup NPE a, ak ipèrplasi zo a rive pi vit soti nan 12 a 20 semèn (figi 2C) konpare ak gwoup NPE a, pa gen okenn chanjman enpòtan obsève nan vètebral la modle. kò; Gwoup Sham ak gwoup ME (Fig. 2C) 2A,B).
(A) Sifas kò vertebral la nan pòsyon implanté a trè lis, twou a geri byen, epi pa gen okenn hyperplasia nan kò vètebral la. (B) Fòm nan sit la implanted nan gwoup la ME se menm jan ak sa ki nan gwoup la operasyon sham, epi pa gen okenn chanjman evidan nan aparans nan sit la implant sou tan. (C) Ipèrplasi zo ki te fèt nan sit enplantasyon an nan gwoup NPE a. Ipèrplasi zo a te ogmante rapidman e menm pwolonje nan disk la entèvèrtebral nan kò vètebral kontralateral la.
Analiz histolojik bay plis enfòmasyon detaye sou fòmasyon zo yo. Figi 3 montre foto seksyon apre operasyon yo tache ak H&E. Nan gwoup sham-operasyon an, chondrocytes yo te byen ranje epi pa gen okenn pwopagasyon selil yo te detekte (Fig. 3A). Sitiyasyon an nan gwoup ME a te menm jan ak sa ki nan gwoup la sham-operasyon (figi 3B). Sepandan, nan gwoup NPE a, yo te obsève yon gwo kantite chondrocytes ak pwopagasyon selil NP-tankou nan sit enplantasyon an (figi 3C);
(A) Trabeculae ka wè tou pre plak la fen, chondrocytes yo byen ranje ak gwosè selil inifòm ak fòm epi pa gen okenn pwopagasyon (40 fwa). (B) Kondisyon sit enplantasyon an nan gwoup ME a sanble ak gwoup sham la. Trabeculae ak chondrocytes ka wè, men pa gen okenn pwopagasyon evidan nan sit enplantasyon an (40 fwa). (B) Li ka wè ke chondrocytes ak selil NP-tankou pwopagasyon anpil, ak fòm ak gwosè chondrocytes yo inegal (40 fwa).
Ekspresyon mRNA interleukin 4 (IL-4), mRNA interleukin 17 (IL-17) ak mRNA entèferon γ (IFN-γ) te obsève nan tou de gwoup NPE ak ME. Lè yo te konpare nivo ekspresyon jèn sib yo, ekspresyon jèn IL-4, IL-17, ak IFN-γ te siyifikativman ogmante nan gwoup NPE konpare ak gwoup ME ak gwoup operasyon sham (figi 4). (P <0.05). Konpare ak gwoup operasyon simulation, nivo ekspresyon IL-4, IL-17, ak IFN-γ nan gwoup ME ogmante sèlman yon ti kras epi yo pa t rive nan chanjman estatistik (P> 0.05).
Ekspresyon mRNA IL-4, IL-17 ak IFN-γ nan gwoup NPE a te montre yon tandans siyifikativman pi wo pase sa yo ki nan gwoup operasyon sham ak gwoup ME (P <0.05).
Kontrèman, nivo ekspresyon yo nan gwoup ME pa montre okenn diferans enpòtan (P> 0.05).
Yo te fè analiz Western blot lè l sèvi avèk antikò ki disponib nan komès kont IL-4 ak IL-17 pou konfime modèl ekspresyon mRNA ki chanje. Jan yo montre nan Figi 5A, B, konpare ak gwoup ME ak gwoup operasyon sham, nivo pwoteyin IL-4 ak IL-17 nan gwoup NPE yo te siyifikativman ogmante (P <0.05). Konpare ak gwoup operasyon sham la, nivo pwoteyin IL-4 ak IL-17 nan gwoup ME a tou echwe pou pou rive nan chanjman estatistik enpòtan (P> 0.05).
(A) Nivo pwoteyin IL-4 ak IL-17 nan gwoup NPE yo te siyifikativman pi wo pase sa yo ki nan gwoup ME ak gwoup plasebo (P <0.05). (B) Istogram Western blot.
Akòz kantite limite echantiyon imen yo jwenn pandan operasyon an, etid klè ak detaye sou patojèn MC yo se yon ti jan difisil. Nou te eseye etabli yon modèl bèt nan MC pou etidye mekanis potansyèl patolojik li yo. An menm tan an, yo te itilize evalyasyon radyolojik, evalyasyon histolojik ak evalyasyon byolojik molekilè pou swiv kou MC pwovoke pa otogrèf NP. Kòm yon rezilta, modèl enplantasyon NP la te lakòz yon chanjman gradyèl nan entansite siyal soti nan 12-semèn nan 20-semèn pwen tan (melanje siyal ki ba nan sekans T1W ak siyal ki ba nan sekans T2W), ki endike chanjman tisi yo, ak istolojik ak molekilè. evalyasyon byolojik konfime rezilta etid radyolojik la.
Rezilta yo nan eksperyans sa a montre ke chanjman vizyèl ak istolojik ki te fèt nan sit la nan vyolasyon kò vertebral nan gwoup la NPE. An menm tan an, ekspresyon de IL-4, IL-17 ak IFN-γ jèn yo, osi byen ke IL-4, IL-17 ak IFN-γ yo te obsève, ki endike ke vyolasyon an nan tisi nwayo pulposus otològ nan vètebral la. kò ka lakòz yon seri siyal ak chanjman mòfolojik. Li fasil pou jwenn ke karakteristik siyal kò vètebral yo nan modèl bèt la (siyal ki ba nan sekans T1W, siyal melanje ak siyal ki ba nan sekans T2W) yo sanble anpil ak sa yo ki nan selil vètebral imen an, ak karakteristik yo MRI tou. konfime obsèvasyon istoloji ak anatomi brit, se sa ki, chanjman ki fèt nan selil kò vètebral yo pwogresif. Malgre ke repons enflamatwa ki te koze pa chòk egi a ka parèt touswit apre twou, rezilta MRI te montre ke chanjman siyal yo te ogmante pwogresifman te parèt 12 semèn apre twou epi pèsiste jiska 20 semèn san okenn siy rekiperasyon oswa ranvèse chanjman MRI. Rezilta sa yo sijere ke otològ vètebral NP se yon metòd serye pou etabli MV pwogresif nan lapen.
Modèl ponksyon sa a mande pou konpetans adekwa, tan, ak efò chirijikal. Nan eksperyans preliminè, diseksyon oswa eksitasyon twòp nan estrikti yo ligaman paravertebral ka lakòz fòmasyon nan osteophytes vertebral. Yo ta dwe pran prekosyon pou pa domaje oswa irite disk adjasan yo. Depi pwofondè pénétration yo dwe kontwole pou jwenn rezilta ki konsistan ak repwodiktif, nou te fè yon ploge manyèlman pa koupe djenn yon zegwi 3 mm long. Sèvi ak ploge sa a asire pwofondè perçage inifòm nan kò vètebral la. Nan eksperyans preliminè, twa chirijyen òtopedik ki enplike nan operasyon an te jwenn zegwi 16-kalib pi fasil pou travay avèk pase zegwi 18-kalib oswa lòt metòd. Pou evite twòp senyen pandan perçage, kenbe zegwi a toujou pou yon ti tan ap bay yon twou ensèsyon pi apwopriye, sijere ke yon sèten degre nan MC ka kontwole nan fason sa a.
Malgre ke anpil etid yo te vize MC, yo konnen ti kras sou etyoloji a ak patojèn nan MC25,26,27. Ki baze sou etid anvan nou yo, nou te jwenn ke otoiminite jwe yon wòl kle nan ensidan an ak devlopman nan MC12. Etid sa a te egzamine ekspresyon quantitative IL-4, IL-17, ak IFN-γ, ki se prensipal chemen diferansyasyon selil CD4 + apre eksitasyon antijèn. Nan etid nou an, konpare ak gwoup negatif la, gwoup NPE a te gen pi wo ekspresyon IL-4, IL-17, ak IFN-γ, ak nivo pwoteyin IL-4 ak IL-17 yo te pi wo tou.
Klinikman, ekspresyon IL-17 mRNA ogmante nan selil NP ki soti nan pasyan ki gen èrni disk28. Ogmante nivo ekspresyon IL-4 ak IFN-γ yo te jwenn tou nan yon modèl herniation disk egi ki pa konpresyon konpare ak kontwòl ki an sante29. IL-17 jwe yon wòl kle nan enflamasyon, blesi tisi nan maladi otoiminitè30 ak amelyore repons iminitè a nan IFN-γ31. Enhanced IL-17-medyatè blesi tisi yo te rapòte nan MRL/lpr mice32 ak otoiminite-sansib sourit33. IL-4 ka anpeche ekspresyon de cytokin proinflammatory (tankou IL-1β ak TNFα) ak aktivasyon macrophage34. Li te rapòte ke ekspresyon an mRNA nan IL-4 te diferan nan gwoup NPE a konpare ak IL-17 ak IFN-γ nan menm pwen an; Ekspresyon mRNA IFN-γ nan gwoup NPE a te siyifikativman pi wo pase sa nan lòt gwoup yo. Se poutèt sa, pwodiksyon IFN-γ ka yon medyatè nan repons nan enflamatwa pwovoke pa entèkalasyon NP. Etid yo montre ke IFN-γ pwodui pa plizyè kalite selil, ki gen ladan selil T asistan tip 1 aktive, selil asasen natirèl, ak macrophages35,36, epi li se yon kle pro-enflamatwa sitokin ki ankouraje repons iminitè37.
Etid sa a sijere ke repons otoiminitè ka patisipe nan ensidan an ak devlopman nan MC. Luoma et al. te jwenn ke karakteristik siyal yo nan MC ak NP enpòtan yo sanble sou MRI, ak tou de montre siyal segondè nan sekans T2W38. Gen kèk sitokin yo te konfime yo dwe asosye byen ak ensidan an nan MC, tankou IL-139. Ma et al. sigjere ke pwotrusion nan anwo oswa anba nan NP ka gen yon gwo enfliyans sou ensidan an ak devlopman nan MC12. Bobechko40 ak Herzbein et al.41 rapòte ke NP se yon tisi imunotoleran ki pa ka antre nan sikilasyon vaskilè depi nesans. Pwoteksyon NP entwodui kò etranje nan rezèv san an, kidonk medyatè reyaksyon otoiminitè lokal yo42. Reyaksyon otoiminitè yo ka pwovoke yon gwo kantite faktè iminitè, epi lè faktè sa yo kontinyèlman ekspoze a tisi yo, yo ka lakòz chanjman nan siyal. Nan etid sa a, twòp ekspresyon nan IL-4, IL-17 ak IFN-γ se faktè iminitè tipik, plis pwouve relasyon sere ant NP ak MCs44. Modèl bèt sa a byen imite zouti NP ak antre nan plak la fen. Pwosesis sa a plis revele enpak otoiminite sou MC.
Kòm espere, modèl bèt sa a bay nou yon platfòm posib pou etidye MC. Sepandan, modèl sa a toujou gen kèk limit: premyèman, pandan faz obsèvasyon bèt la, kèk lapen etap entèmedyè bezwen yo dwe elimine pou tès istolojik ak byoloji molekilè, kidonk kèk bèt "tonbe nan itilize" sou tan. Dezyèmman, byenke twa pwen tan yo mete nan etid sa a, malerezman, nou sèlman modle yon sèl kalite MC (Modic tip I chanjman), kidonk li pa ase yo reprezante pwosesis devlopman maladi imen an, ak plis pwen tan yo bezwen mete nan. pi byen obsève tout chanjman siyal yo. Twazyèmman, chanjman ki fèt nan estrikti tisi yo ka montre klèman pa tach istolojik, men kèk teknik espesyalize ka pi byen revele chanjman mikwostriktirèl nan modèl sa a. Pou egzanp, yo te itilize mikwoskòp limyè polarize pou analize fòmasyon fibrocartilage nan disk entèvèrtebral lapen45. Efè alontèm NP sou MC ak endplate mande pou plis etid.
Senkant-kat gason New Zeland blan lapen (pwa sou 2.5-3 kg, laj 3-3.5 mwa) yo te owaza divize an gwoup operasyon fo, gwoup implantation nan misk (gwoup ME) ak gwoup implantation rasin nè (gwoup NPE). Tout pwosedi eksperimantal yo te apwouve pa Komite Etik nan Lopital Tianjin, ak metòd eksperimantal yo te pote soti nan akò strik ak direktiv yo apwouve.
Gen kèk amelyorasyon ki fèt nan teknik chirijikal S. Sobajima 46 . Yo te mete chak lapen nan yon pozisyon kouche lateral epi yo te ekspoze sifas anterior senk disk lonbèr youn apre lòt (IVDs) lè l sèvi avèk yon apwòch retroperitoneal posterolateral. Chak lapen te bay anestezi jeneral (20% uretan, 5 ml / kg atravè venn zòrèy la). Yo te fè yon ensizyon po longitudinal soti nan kwen ki pi ba nan zo kòt yo nan rebò basen an, 2 cm ventral nan misk yo paravertebral. Dwat anterolateral kolòn vètebral la soti nan L1 rive L6 te ekspoze pa diseksyon byen file ak bouche nan tisi lar ki kache, tisi retroperitoneal, ak misk (figi 6A). Nivo disk la te detèmine lè l sèvi avèk rebò basen an kòm yon bòn tè anatomik pou nivo disk L5-L6. Sèvi ak yon zegwi pike kalib 16 pou fè yon twou toupre plak fen vètebral L5 la nan yon pwofondè 3 mm (Fig. 6B). Sèvi ak yon sereng 5-ml pou aspire nwayo pulposus otològ nan disk entèvètebral L1-L2 (figi 6C). Retire nwayo pulposus oswa misk selon kondisyon chak gwoup. Apre twou egzèsis la apwofondi, yo mete suture absorbable sou fasa a gwo twou san fon, fascia supèrfisyèl ak po, pran swen pou pa domaje tisi periosteal kò vètebral la pandan operasyon an.
(A) Disk L5-L6 ekspoze atravè yon apwòch retroperitoneal posterolateral. (B) Sèvi ak yon zegwi kalib 16 pou fè yon twou toupre plak final L5 la. (C) Yo rekòlte MF otològ.
Anestezi jeneral yo te administre ak 20% urethane (5 ml / kg) administre atravè venn nan zòrèy, ak radyografi kolòn vètebral lonbèr yo te repete nan 12, 16, ak 20 semèn apre operasyon.
Lapen yo te sakrifye pa piki nan miskilè ketamin (25.0 mg / kg) ak nan venn sodyòm pentobarbital (1.2 g / kg) nan 12, 16 ak 20 semèn apre operasyon. Yo te retire kolòn vètebral la tout antye pou analiz histolojik epi yo te fè analiz reyèl. Transkripsyon ranvèse quantitative (RT-qPCR) ak Western blotting yo te itilize pou detekte chanjman nan faktè iminitè yo.
Egzamen MRI yo te fèt nan lapen lè l sèvi avèk yon leman klinik 3.0 T (GE Medical Systems, Florence, SC) ekipe ak yon reseptè bobin orthogonal manm. Lapen yo te anestezi ak 20% urethane (5 mL/kg) atravè venn zòrèy la epi yo te mete soupin nan leman an ak rejyon an lonbèr santre sou yon bobin sifas sikilè 5-pous dyamèt (GE Medical Systems). Imaj lokalizasyon Coronal T2-weighted (TR, 1445 ms; TE, 37 ms) yo te akeri pou defini kote disk la lonbèr soti nan L3-L4 rive L5-L6. Sagittal plan T2-weighted tranch yo te akeri ak anviwònman sa yo: vit vire-eko sekans ak yon tan repetisyon (TR) nan 2200 ms ak yon tan eko (TE) nan 70 ms, matris; jaden vizyèl nan 260 ak uit stimuli; Epesè koupe a te 2 mm, espas sa a te 0.2 mm.
Apre yo te fin pran dènye foto a epi yo te touye dènye lapen an, yo te retire disk sham, ki te mete nan misk yo ak NP pou egzamen histolojik. Tisi yo te fikse nan fòmalin 10% net tanpon pou 1 semèn, dekalsifye ak asid ethylenediaminetetraacetic, ak seksyon parafin. Blòk tisi yo te entegre nan parafine epi koupe an seksyon sagittal (5 μm epè) lè l sèvi avèk yon mikrotom. Seksyon yo te tache ak ematoksilin ak eozin (H&E).
Apre yo fin kolekte disk intervertebral yo nan lapen yo nan chak gwoup, yo te ekstrè RNA total lè l sèvi avèk yon kolòn UNIQ-10 (Shanghai Sangon Biotechnology Co., Ltd., Lachin) dapre enstriksyon manifakti a ak yon sistèm transkripsyon ranvèse ImProm II (Promega Inc. , Madison, WI, USA). Transkripsyon ranvèse te fèt.
Yo te fè RT-qPCR lè l sèvi avèk yon Prism 7300 (Applied Biosystems Inc., USA) ak SYBR Green Jump Start Taq ReadyMix (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) dapre enstriksyon manifakti a. Volim reyaksyon PCR la te 20 μl e li te genyen 1.5 μl cDNA dilye ak 0.2 μM chak primè. Jadendantè yo te fèt pa OligoPerfect Designer (Invitrogen, Valencia, CA) ak manifaktire pa Nanjing Golden Stewart Biotechnology Co, Ltd (Lachin) (Tablo 1). Kondisyon siklis tèmik sa yo te itilize: premye etap aktivasyon polymerase nan 94 ° C pou 2 min, Lè sa a, 40 sik nan 15 s chak nan 94 ° C pou denaturasyon modèl, annealing pou 1 min nan 60 ° C, ekstansyon, ak fliyoresans. mezi yo te fèt pou 1 minit nan 72 ° C. Tout echantiyon yo te anplifye twa fwa epi yo te itilize valè mwayèn pou analiz RT-qPCR. Done anplifikasyon yo te analize lè l sèvi avèk FlexStation 3 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA). IL-4, IL-17, ak ekspresyon jèn IFN-γ yo te nòmalize nan kontwòl andojèn (ACTB). Nivo ekspresyon relatif mRNA sib yo te kalkile lè l sèvi avèk metòd 2-ΔΔCT.
Pwoteyin total te ekstrè soti nan tisi lè l sèvi avèk yon omojèn tisi nan tanpon RIPA lysis (ki gen yon bwason inibitè proteaz ak fosfataz) ak Lè sa a, santrifuje nan 13,000 rpm pou 20 min nan 4 ° C pou retire debri tisi. Yo te chaje senkant mikwogram pwoteyin pou chak liy, separe pa 10% SDS-PAGE, ak Lè sa a, transfere nan yon manbràn PVDF. Bloke te fèt nan 5% lèt sèk san grès nan Tris-tampon saline (TBS) ki gen 0.1% Tween 20 pou 1 èdtan nan tanperati chanm. Manbràn la te enkube ak antikò prensipal lapen anti-decorin (dilye 1:200; Boster, Wuhan, Lachin) (dilye 1:200; Bioss, Beijing, Lachin) lannwit lan nan 4 ° C epi li te reyaji nan dezyèm jou yo; ak antikò segondè (kabrit anti-lapen imunoglobulin G nan 1:40,000 dilution) konbine avèk peroksidaz refor (Boster, Wuhan, Lachin) pou 1 èdtan nan tanperati chanm. Siyal Western blot yo te detekte pa ogmante chemiluminescence sou manbràn chemiluminesan apre X-ray iradyasyon. Pou analiz densitometrik, yo te analize blots epi yo te mezire lè l sèvi avèk lojisyèl BandScan epi rezilta yo te eksprime kòm rapò iminoreaktivite jèn sib ak iminoreaktivite tubulin.
Kalkil estatistik yo te fèt lè l sèvi avèk pake lojisyèl SPSS16.0 (SPSS, USA). Done yo kolekte pandan etid la te eksprime kòm mwayen ± devyasyon estanda (mwayèn ± SD) epi yo te analize lè l sèvi avèk yon sèl-fason analiz repete mezi divèjans (ANOVA) pou detèmine diferans ki genyen ant de gwoup yo. P <0.05 te konsidere kòm estatistik enpòtan.
Se konsa, etablisman an nan yon modèl bèt nan MC pa enplantasyon NPs otològ nan kò vètebral la ak fè obsèvasyon makroanatomik, analiz MRI, evalyasyon istolojik ak analiz byolojik molekilè ka vin yon zouti enpòtan pou evalye ak konprann mekanis yo nan MC imen ak devlope nouvo ka geri. entèvansyon.
Ki jan yo site atik sa a: Han, C. et al. Yo te etabli yon modèl bèt nan chanjman Modic pa enplantasyon nwayo pulposus otològ nan zo a subkondral nan kolòn vètebral la lonbèr. Sci. Rep. 6, 35102: 10.1038/srep35102 (2016).
Weishaupt, D., Zanetti, M., Hodler, J., ak Boos, N. D 'resonans mayetik nan kolòn vètebral la lonbèr: prévalence de èrni disk ak retansyon, konpresyon rasin nè, anomali plak fen, ak osteoartriti fasèt nan volontè asymptomatik. . to. Radyoloji 209, 661-666, doi:10.1148/radiology.209.3.9844656 (1998).
Kjaer, P., Korsholm, L., Bendix, T., Sorensen, JS, ak Leboeuf-Eed, K. Modic chanjman ak relasyon yo ak rezilta klinik yo. European Spine Journal: piblikasyon ofisyèl Sosyete Ewopeyen an kolòn vètebral, Sosyete Ewopeyen an nan defòmasyon epinyè, ak Sosyete Ewopeyen an pou rechèch kolòn vètebral nan matris 15, 1312-1319, doi: 10.1007/s00586-006-0185-x (2006).
Kuisma, M., et al. Chanjman modik nan endplates vètebral lonbèr yo: prévalence ak asosyasyon ak doulè nan do ki ba ak syatik nan travayè gason ki gen laj mwayen. Kolòn vètebral 32, 1116-1122, doi:10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
de Roos, A., Kressel, H., Spritzer, K., ak Dalinka, M. MRI nan chanjman mwèl zo tou pre plak la fen nan maladi dejeneratif nan kolòn vètebral la lonbèr. AJR. Ameriken Journal of Radyoloji 149, 531-534, doi: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
Modic, MT, Steinberg, PM, Ross, JS, Masaryk, TJ, ak Carter, JR Maladi dejeneratif disk: evalyasyon chanjman mwèl vètebral ak MRI. Radyoloji 166, 193-199, doi:10.1148/radiology.166.1.3336678 (1988).
Modic, MT, Masaryk, TJ, Ross, JS, ak Carter, JR Imaging nan maladi disk dejeneratif. Radyoloji 168, 177-186, doi: 10.1148/radiology.168.1.3289089 (1988).
Jensen, TS, et al. Prediktè chanjman siyal neovertebral endplate (Modic) nan popilasyon jeneral la. Jounal kolòn vètebral Ewopeyen an: Piblikasyon ofisyèl nan Sosyete kolòn vètebral Ewopeyen an, Sosyete Ewopeyen an nan defòmasyon epinyè, ak Sosyete Ewopeyen an pou rechèch kolòn vètebral nan matris, Divizyon 19, 129-135, doi: 10.1007 / s00586-009-1184-5 (2010).
Albert, HB ak Mannisch, K. Modic chanjman apre èrni disk lonbèr. European Spine Journal : Piblikasyon ofisyèl nan Sosyete kolòn vètebral Ewopeyen an, Sosyete Ewopeyen an nan Defòmasyon epinyè ak Sosyete Ewopeyen an pou rechèch kolòn vètebral nan matris 16, 977-982, doi: 10.1007 / s00586-007-0336-8 (2007).
Kerttula, L., Luoma, K., Vehmas, T., Gronblad, M., ak Kaapa, E. Modic tip I chanjman ka predi rapidman pwogresif deformation disk koripsyon: yon etid potentiels 1-ane. Ewopeyen kolòn vètebral jounal 21, 1135-1142, doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
Hu, ZJ, Zhao, FD, Fang, XQ ak Fan, SW Modic chanjman: kòz posib ak kontribisyon nan koripsyon disk lonbèr. Ipotèz Medikal 73, 930-932, doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
Krok, HV Entèn disk rupture. Pwoblèm prolaps disk plis pase 50 ane. Kolòn vètebral (Phila Pa 1976) 11, 650-653 (1986).
Tan poste: Dec-13-2024